Серологические реакции применяют для

Серологические реакции применяют для

Переезд склада в Европу.
Реализуем препараты от гепатита С в России по закупочной цене - ликвидация склада
Перейти на сайт

Дисциплина: Медицина
Тип работы: Реферат
Тема: Серологические реакции

2СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ

СЕРОЛОГИЯ — раздел иммунологии,

изучающий взаимодействие АГ

и АТ в пробирочных реакциях (in vitro).

Серологические реакции — реакции с использованием АГ или

АТ

(проводящиеся in vitro).

Серологическими методами

(в диагностике инфекционных заболе-

ваний) называют совокупность пробирочных реакций,

основанных на

АГ-АТ-взаимодействии. /2640к/99/

1) Направленны на выявление в сыворотке крови и

других

жид-

костях организма АТ к АГ возбудителей инфекционных болезней.

2) Проброчные реакции,

имеющие целью обнаружение в сыворотке

крови и

других

субстратах

растворимых

микробных АГ с помощью

стандартных иммунных сывороток.

Серологические реакции проводятся с использованием

1) АГ для поиска АТ

2) АТ для поиска АГ

4 IN VIVO (кожные пробы, РН in vivo …)

4- серопрофилактика (введение АГ, АТ)

4В серологчиеские методы не входят реакции,

которые ставят на

4людях или животных (реакция Шика,

Дика), и серологическая иден-

4тификация культур микроорганизмов (это один из этапов

бактерио-

4логического метода.

КЛАССИФИКАЦИЯ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ

1. Двухкомпонентные

— простые (РА,РП)

— розеточные тесты (РОК)

— цитофлюоресцентные методы

— сложные (РН /гемадсорбции,

токсина, …,РТГА,РНГА, ре-

акция прямой имунофлюоресценции, реакции адгезии).

Реакции адгезии отличаются взаимодействием частиц, например,

клетки, с серологически активной поверхностью,

в т.ч. с другой

клеткой. /2260к/

2. Трехкомпонентные

— простые

— реакция бактериолиза,

— реакция коагглютинации

— сложные

— реакция непрямой иммунофлюоресценции,

— РИА,

— РЭМА,

— литические

тесты

(РСК,

определение

АОК с помощью

эритроцитарных АГ-ов),

— использование

электронного

парамагнитного

и ядер-

но-магнитного резонанса) /7271/87/,

Материал для серологических реакций:

— сыворотка

крови

(парные

сыворотки).

Заморозка в течение

10-14 дней.

— ликвор,

— моча,

— фильтрат испражнений,

— промывные воды бронхов, полости рта, глотки, носа /2640к/,

желудка.

— Слизь (шейки матки, … — здесь АТ порой больше, чем вы сы-

воротке)

Учет серологических реакций осуществляется видуально, иногда

с помощью лупы и редко — микроскопа. /2640к/99/

При оценке серологических реакций применяют 3 главных крите-

рия

/2640к/99/:

— наличие и интенсивность реакции (в плюсах и др.),

— диагностический титр,

заранее отработанный для всех забо-

леваний,

— нарастание титра АТ в течение болезни в 4 и более раза.

В процессе оценки серологических реакций часто возникает не-

обходимость дифференцировки

1) специфической реакции (на видовые и типовые антигены) от

группоспецифической (на межвидовые

АГ)

[Группоспец.

АГ

Salm. — табл.]

4— дифференцировка по моноспецифическим антисывороткам,

4— по скорости нарастания титра АТ, которая выше к специ-

4— по реакции адсорбции АТ избытком антигена

4— по

легкости диссоциации ИК под влиянием диссоцирующих

2) ИО на текущую инфекцию от ИО на перенесенное ранее заболе-

вание и иммунизацию. /2640к/99/

5— Оценивают по темпу нарастания АТ.

При постановке любой серологической

реакции

параллельно

опытом ставятся .:

— микробная культура не должна образовывать хлопья при

ана-

логичном встряхивании;

— сыворотка

антисыворотка

не

должны

быть

хлопьями

(хлопья

появляются в процессе хранения белков в связи с посте-

пенным оголением углеводных компонентов;

углеводные компоненты

белков,

будучи жесткими разветвленными структурами, \»запутыва-

ются друг в друге\», обуславливая агрегацию белков);

— сыворотка морской свинки,

используемая как источник комп-

лемента, должна лизировать эритроциты (т.е.

работать): компле-

мент + ЭБ — лизис;

— диагностикум не должен содержать хлопьев и пр.

— при поиске АГ обязательно используется параллельно

музей-

ный АГ, который должен однозначно выявляться при проведении ме-

тодики (это значит,

что все компоненты реакции \»работают\», ме-

тодика поставлена правильно).

3РЕАКЦИИ АГГЛЮТИНАЦИИ /РА/

РА — реакции склеивания микробов,

частиц латекса или эрит-

роцитов /реакция гемагглютинации

РГА/.

АГ-несущие

частицы

склеиваются антителами и выпадают в видимый осадок.

считают

максимальное

разведение,

дающее

агглютинацию АГ.

\\ / \\ /

\\ / \\ /

\\ / \\ /

|\\ /

\\ / \\ /|

| |

| |

+n

0 — клетка

— — молекула антитела

2Прямая РА

В этой реакции антитела (агглютинины) непосредственно агглю-

тинируют корпускулярные АГ (агглютиногены).

0 агглютинация происходит при склеивании микробов,

содержащих О-антиген.

0 агглютинация происходит с бактериями, имеющи-

ми жгутики (Н-антигены).

2Прямая реакция агглютинации (РА)

. (на предметном стекле)

1Постановка реакции:

|Микробная суспензия

|+ антисыворотка к микробу

0 — хлопья (агглютинаты)

5Для определения

микробного

вида (серотипирования) на пред-

5метное стекло наносится 1 капля (0,05мл) диагностической

сыво-

5ротки,

разведенной

физиологическим раствором 1:25.

На вторую

5половину

стекла

наносится

капля

физиологического

раствора

5(контроль).

К каждой капле добавляется равный объем испытуемой

5культуры.Слегка покачивая стекло,

наблюдать за течением

реак-

5ции:

феномен

агглютинации

проявляется

выпадением

хлопьев и

5просветлением жидкости в капле.

В контроле микробная

культура

. проводится в ряду пробирок или лунок для

раститровки сыворотки больного (определения титра АТ)

1Постановка реакции:

|Сыворотка больного,

содержащая

АТ к микробу — рас-

титровка

|+ микробная

суспензия

(равное количество во все про-

бирки или лунки

0 — хлопья (агглютинаты) микробов

5Для определения

антител

в сыворотке крови больного поста-

5вить в штатив 7 пробирок и налить в каждую из них по 0,5 мл фи-

5зиологического раствора.

Добавить в первую пробирку 0,5 мл сы-

5воротки больного,

разведенную в 50 раз,

перемешать. 0,5 мл из

5первой пробирки перелить во вторую,

из второй про-

5бирки 0,5 мл перелить в третью и т.д. Из последней пробирки вы-

5лить для равенства объемов 0,5 мл в банку с дезраствором.В каж-

5дую пробирку добавляют по 2 капли антигена

или

диагностикума.

5Оформить

контроля — контроль антигена (для исключения спон-

5танной агглютинации) и контроль сыворотки в исходном разведении

51:50.

5Рабочая схема РА:

5—————————————————————

5Ингредиенты |

Ряд пробирок

5|————————————————

5|

5—————————————————————

51. Физраствор

52. Сыворотка

5больного 1:50

5Полученные

5титры

1:100 1:200 1:400 1:800 1:1600

1:50

53. Диагнос-

5тикум в

5каплях

5Инкубация в термостате 2 часа при 370С, затем при

5необходимости 24 часа при комнатной температуре.

5Учет результатов реакции проводят через 24 часа по следующей

5схеме:

5++++ полная агглютинация,

жидкость

прозрачная,

выраженный

5+++

5++ или

+ сомнительная реакция,

жидкость равномерно мутная,

отрицательная реакция,

жидкость равномерно мутная,

5осадок отсутствует.

5Титром агглютинирующей сыворотки считается т…

Забрать файл

Похожие материалы:



Источник: www.refland.ru


Добавить комментарий